تفاعل البوليميراز المتسلسل

أنابيب بلاستيكية يحوي كل منها على 100μl من مزيج تفاعل PCR

جهاز اختبار تفاعل البوليميرز المتسلسل PCR

تفاعل البوليميريز المتسلسل (بالإنجليزية: Polymerase chain reaction) هي طريقة مستخدمة بكثرة في البيولوجيا الجزيئية. يشتق اسمه من إحدى عناصره الأساسية وهو دنا بوليميريز والذي يستخدم لتكثير و تكوين نسخ عديدة من قطعة من الدنا من خلال تناسخ إنزيمي خارج الكائنات الحية. عندما يتطور التفاعل، فإن الدنا المصنع يستخدم كقالب للتناسخ. وذلك يُنشط تفاعل متسلسل والذي يحدث فيه تكبير أسي لقالب الدنا. من الممكن، من خلال هذا التفاعل عمل ملايين النسخ لقطعة مفردة من الدنا أو عدة قطع. يمكن تعديل تفاعل البوليميريز المتسلسل لعمل تعديلات وراثية عديدة.

تستخدم كل تطبيقات تفاعل البوليميريز المتسلسل دنا بوليمريز مستقر حراريا، مثل تاك بوليمريز وهو إنزيم عزل من بكتريا المستحرة المائية. يعمل هذا الإنزيم على تجميع خيط دنا جديد من النيوكليوتيدات (مكعبات بناء الدنا)، وذلك باستعمال خيط دنا مفرد كقالب وقليلات النيوكليوتيدات (تسمى أيضا بوادئ الدنا) وهي مطلوبة لبدأ تصنيع الدنا. معظم طرق تفاعل البلمرة المتسلسل تستخدم التدوير الحراري بمعنى أنه يتم تسخين وتبريد عينة تفاعل البوليميريز المتسلسل وذلك طبقا لسلسلة خطوات حرارية محددة.

وضعت في عام 1983 من قبل كاري موليس ، والآن هذه التقنية لا يستغنى عنها في كثير من الأحيان ويتم استخدمها في مختبرات البحوث الطبية والبيولوجية لمجموعة متنوعة من التطبيقات وتشمل هذه استنساخ DNA المتسلسل المعتمدة على الحمض النووي , علم الوراثة العرقي ، أو التحليل الوظيفي من الجينات ، وتشخيص الأمراض الوراثية ، وتحديد بصمات الوراثية (المستخدمة في علوم الطب الشرعي و اختبار الأبوة )، وكشف وتشخيص الأمراض المعدية , في عام 1993، حصل على جائزة موليس على جائزة نوبل في الكيمياء مع مايكل سميث لعمله على PCR

الاستخدام

هناك لتفاعل البلمرة المتسلسل العديد من الاستخدامات لعل أهمها

• استخدامات طبية على سبيل المثال في تشخيص بعض الأمراض وتحديد اعداد الفيروسات في الدم
• تحديد البصمة الجينية لشخص ما في اطار الطب الشرعي
• إثبات هوية الأب الحقيقي للمولود
• استنساخ الجينات الوراثية

انظر أيضا

• تفاعل تسلسلي
• تفاعل البوليميراز المتسلسل ذو البداية الساخنة
• تفاعل البوليميراز المتسلسل ذو الوقت الحقيقي

---